培養(yǎng)用品的清洗
培養(yǎng)用品的清洗
目前我國(guó)細(xì)胞培養(yǎng)器皿主要仍使用能反復(fù)使用的玻璃器皿,清洗的主要目的為清除雜質(zhì)和微生物,使在器皿內(nèi)不殘留任何影響細(xì)胞生長(zhǎng)的成份。因而在組織細(xì)胞培養(yǎng)中清洗和消毒是一項(xiàng)極為重要的環(huán)節(jié)。
在組織細(xì)胞培養(yǎng)中,體外細(xì)胞對(duì)任何有害物質(zhì)都非常敏感。微生物產(chǎn)品附帶雜物,上次細(xì)胞殘留物及非營(yíng)養(yǎng)成分的化學(xué)物質(zhì),均能影響培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此對(duì)新使用和重新使用的培養(yǎng)器皿都要嚴(yán)格*的清洗,且要根據(jù)器皿的組成材料不同,選擇不同的清洗方法。
1、玻璃器皿的清洗
組織細(xì)胞培養(yǎng)中,使用量zui大的是玻璃器皿,故工作zuizui大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、侵酸和沖洗四個(gè)步驟。清洗后的玻璃器皿僅要求干凈透明無(wú)油跡,而且不能殘留任何物質(zhì)。
?。?)浸泡:初次使用和培養(yǎng)使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附著物軟化或被溶液掉。新的初次使用的玻璃器皿,在生產(chǎn)及運(yùn)輸過程中,玻璃表面帶有大量的干固的灰塵,且玻璃表面常呈堿性及帶有一些對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì)等。新瓶使用前應(yīng)先用自來(lái)水簡(jiǎn)單刷洗,然后用稀鹽酸液(5)浸泡過夜,以中和其中的堿性物質(zhì)。再次使用的玻璃器皿則常附有大量剛使用過的蛋白質(zhì),干固后不易洗掉,故用后要立即浸入水中,且要求*浸入,不能留有氣泡或浮在液面上。
?。?)刷洗:浸泡后的玻璃器皿一般要用毛刷沾洗滌劑刷洗,以除去器皿表面附著較牢的雜質(zhì)。刷洗要適度,過度會(huì)損害器皿表面光澤度。
(3)浸酸:清潔液是由重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水按一定比例配制而成,其處理過程稱為浸酸。清潔液對(duì)玻璃器皿無(wú)腐蝕作用,而其強(qiáng)氧化作用可除掉刷洗不掉的微量雜質(zhì)。清潔液去污能力很強(qiáng)。是清洗過程中關(guān)鍵的一環(huán)。浸泡時(shí)器皿要充滿清潔液,勿留氣泡或器皿露出清潔液面。浸泡時(shí)間一般為過夜,不應(yīng)少于6小時(shí)。清潔液可根據(jù)需要,配制成不同的強(qiáng)度,常用的下列三種:重鉻酸鉀(g)濃硫酸(ml)蒸餾水(ml)(A)強(qiáng)清潔液631000200000B)次強(qiáng)清洗液1202001000(C)弱清潔液100100100
清潔液配制時(shí)應(yīng)注意安全,須穿戴耐酸手套和圍裙,并要保護(hù)好面部及身體裸露部分。配制過程中可使重鉻酸鉀溶于水中,然后慢慢加濃硫酸。并不停的用玻璃棒攪拌,使產(chǎn)生的熱量揮發(fā),配制過程中可使重鉻酸鉀溶于水中,然后慢慢加濃硫酸。并不停的用玻璃棒攪拌,使產(chǎn)生的熱量揮發(fā),配制溶液應(yīng)選擇塑料制品。配成后清潔液一般為棕紅色。
?。?)沖洗:玻璃器皿在使用后,刷洗及浸泡后都必須用水充分沖洗。使之盡量不留污染或潔液的殘跡。沖洗用洗滌裝置。即省力、效果又好。如用手工操作,則需流水沖洗十次以上,每天水須灌滿及倒干凈,用蒸餾水清洗3-5次,晾干備用。
2、膠塞的清洗
細(xì)胞培養(yǎng)中所用的橡膠制品主要是瓶塞。新購(gòu)置的瓶塞帶有大量滑石粉及雜質(zhì),應(yīng)先用自來(lái)水沖洗,再做常規(guī)處理,常規(guī)清洗方法是:每次用后立即置入水中浸泡,然后用2%NaOH或洗衣粉煮沸10-20分鐘,以除掉培養(yǎng)中的蛋白質(zhì)。自來(lái)水沖洗后,再用1%稀鹽酸浸泡30分鐘或蒸餾水沖洗后再煮沸10-20分鐘,晾干備用。
3、塑料制品的清洗
塑料自制品現(xiàn)多是采用無(wú)毒并已經(jīng)特殊處理的包裝,打開包裝即可用,多為一次性物品。必要時(shí)用2%NaOH浸泡過夜,用自來(lái)水充分沖洗,再用5%鹽酸溶液浸泡30分鐘,zui后用自來(lái)水和蒸餾水沖洗干凈,晾干備用。
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