ELISA試劑盒原理

本試劑盒系由預(yù)包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)椋挥妹笜?biāo)儀在450nm波長測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。

ELISA試劑盒操作流程:

1.進(jìn)入試劑準(zhǔn)備區(qū)，開啟冰箱冷凍層取出HBV- DNA檢測(cè)試劑盒。查看外包裝盒(包括生產(chǎn)批號(hào)、有效期)，無誤后拆開試劑盒，取出核酸提取液、反應(yīng)液及Taq酶(核對(duì)核酸提取液、HBVPCR 反應(yīng)液及Taq酶管上批號(hào)與試劑外包裝盒批號(hào)是否一-致) 不一致則不可使用，需更換新的試劑。室溫平衡20min,融化后2000rpm離心備用。

2、核酸提取液的分裝

(1)取0.5ml離心管架置于超凈工作臺(tái)內(nèi)(開機(jī)前用紫外線消毒30分鐘)，用右手拿起鑷子逐個(gè)將離心管放入離心管架( 注意應(yīng)夾住離心管外壁，不能碰到管內(nèi)壁)，擺放順序?yàn)闄M列從左往右擺。