兔ELISA實驗中不同樣本的出現(xiàn)沉淀方法你知道嗎
近日,濟南醫(yī)學院一位大一新生在我司購買了兔elisa試劑盒,并在電話中咨詢了兔ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求。為了讓更多的人了解,我司特在此為您做出如下分析:
關于血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。在血漿上,應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 尿液則用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
細胞培養(yǎng)上清
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清 。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意:標本采集后盡早進行提取,兔ELISA試劑盒提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.。不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。