豚鼠elisa試劑盒的操作步驟及注意事項(xiàng)介紹
2022-11-12
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豚鼠elisa試劑盒的操作步驟:
1、加入10ul標(biāo)準(zhǔn)品(Standards)、10ul標(biāo)本于相應(yīng)反應(yīng)板孔中。
2、每孔加入40ulAntimouseIL-1Biotin和40ulAntimouseIL-1POD。輕輕混勻30秒,封住板孔,室溫溫育45分鐘。
3、洗板:甩盡板內(nèi)液體,用洗滌液洗滌反應(yīng)板,并去除水滴);反復(fù)洗滌5次。
4、每孔加入100ul顯色液,輕輕混勻10秒,室溫溫育20分鐘。
5、每孔加入100ul終止液(StopSolution)。輕輕混勻30秒;30分鐘內(nèi)在450nm處讀OD值。
6、以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
豚鼠elisa試劑盒的操作注意事項(xiàng):
1、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6、在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。