小鼠促卵泡素(FSH)檢測原理!
2022-07-18
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小鼠促卵泡素(FSH)檢測原理!
產(chǎn)品名稱:小鼠促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T
儲存條件:2-8℃,避光防潮保存
有效期:6個月
檢測原理:
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠促卵泡素(FSH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并澈底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的小鼠促卵泡素(FSH)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
實驗步驟(僅供參考)
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。