樣本的收集以及保存
○ 樣本收集
1、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層的液體我們稱之為血漿。
①抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。生化實驗一般建議用肝素抗凝。
②不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
選擇抗凝的注意點:
① 每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
② 收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③ 抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④ 抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2、組織樣本的收集:
① 樣本采集:取組織塊(一般每種組織需0.2g以上)在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入凍存管或離心管中。
② 樣本保存:動物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如*凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。
制備好的勻漿液建議不要凍存,當(dāng)天進(jìn)行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降,部分指標(biāo)4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等)
○ 樣本的運輸、轉(zhuǎn)存
① 血液及組織樣本收集齊后深低溫凍存,將凍存的標(biāo)本,放置在裝有5-10公斤干冰的泡沫盒中密封保存運輸。(干冰保證-40℃的溫度,防止樣本的反復(fù)凍融,5-10公斤的干冰可以保證5-7天的溫度)
② 新鮮細(xì)胞可用充氮法。2-3天內(nèi)送達(dá);收集的細(xì)胞及裂解細(xì)胞冷凍液氮或干冰運輸。
③ 細(xì)菌等樣品冰袋低溫運輸。
④ 免疫組化石蠟包埋樣品可加好固定液低溫運輸,或者包埋成蠟塊后常溫運輸;免疫組化的冰凍樣本液氮或干冰運輸。
⑤ PCR相關(guān)實驗使用收集細(xì)胞,可直接在細(xì)胞中加TRIzol充分裂解后用冰袋低溫運輸。
⑥ 客戶所提供的試劑及試劑盒根據(jù)試劑本身保存要求運輸。
○ 注意事項
① 本市可上門取樣;外地客戶請參照上述條件運輸,快遞送達(dá);
② 干冰、液氮、冰袋等低溫材料要充足,保證在運達(dá)目的地之前沒有消耗完。