ELISA的這些要求需知您都知曉了嗎
在運(yùn)用試劑盒操作ELISA辦法試驗(yàn)時(shí),我們需要依照說(shuō)明書(shū)中給出的正確辦法,假如您是研域(上海)化學(xué)的客戶,在試驗(yàn)中有什么問(wèn)題的話,您能夠直接打電話到我公司來(lái),我們將組織技能人員為您解惑,指導(dǎo)試驗(yàn)?;?yàn)槟鷾y(cè)。
ELISA試驗(yàn)的這些要求需知您都知曉了嗎?
1. 在試用期,應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,應(yīng)于37℃孵育15分鐘。
3. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)運(yùn)用,試劑應(yīng)視為感染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
每個(gè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中都是有其留意事項(xiàng)的,這兒就不一一例舉,假如想了解的話也能夠來(lái)電我公司問(wèn)詢,我們將產(chǎn)品我明書(shū)發(fā)送給您。下面就是一些試驗(yàn)技能的相關(guān)須知:
·準(zhǔn)備好一切試驗(yàn)額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;
·依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量斷定所需試劑的量;
·按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑;
·標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法試驗(yàn)者,留意低溫保存。
試驗(yàn)中為了斷定*佳信號(hào)和布景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行互相相抗的滴定。一起,應(yīng)包括在恰當(dāng)規(guī)模內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書(shū)慣例供給的規(guī)模進(jìn)行操作。
規(guī)范品的制造:關(guān)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書(shū),留意每批的細(xì)節(jié)。在運(yùn)用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地回收其間的細(xì)胞因子。依據(jù)每批闡明書(shū)中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
一般待測(cè)抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過(guò)將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用規(guī)范的ELISA操作流程、擴(kuò)大試劑盒、第三類(lèi)試劑、或改變酶底物體系可在必定規(guī)模內(nèi)進(jìn)步靈敏度。
為了優(yōu)化靈敏度,主張過(guò)夜孵育規(guī)范品和標(biāo)本。若運(yùn)用過(guò)氧化物酶作為顯色體系,應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),如血清,主張?jiān)跇?biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
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