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試劑盒操作嚴(yán)格要求定當(dāng)做出好試驗(yàn)
2019-6-18
1838
洗板辦法:①手藝洗板,吸去(不行觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在試驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗刷緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。②主動(dòng)洗板,如果有主動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練運(yùn)用后再用到正式試驗(yàn)過(guò)程中。?試劑盒的制造:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書,留意每批的細(xì)節(jié)。在運(yùn)用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地回收其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批闡明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。一般待測(cè)抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過(guò)將規(guī)...
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處理ELISA試劑盒有哪些要求和方法
2019-6-14
1762
需要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將羊ELISA試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都康復(fù)到室溫,以使成果更安穩(wěn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存,用槍汲取液體時(shí)速度不能太快,避免發(fā)生氣泡而使汲取量不準(zhǔn)確,汲取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,削減差錯(cuò),要確保移液槍的準(zhǔn)確性,差錯(cuò)不能超過(guò)百分之2。1.血清:室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)搜集上清,保存過(guò)程中如呈現(xiàn)沉積,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)羊ELISA試劑盒的標(biāo)本的要求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為...
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ELISA試劑盒操作過(guò)程組份和介紹
2019-6-10
1705
ELISA中有三個(gè)必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等ELISA試劑盒操作過(guò)程:1.加規(guī)范品:在酶標(biāo)包被板上設(shè)規(guī)范品孔,順次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)2.加樣:別離設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其他各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄然晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸...
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ELISA試劑盒分類操作過(guò)程
2019-6-4
1865
1.ELISA試劑盒白介素類可于白色布景上,直接用肉眼查詢效果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。2.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,參與新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗刷。3.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中參與臨...
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試劑盒實(shí)驗(yàn)酶標(biāo)板的三大分類
2019-5-30
2531
依據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合才能的不同,在ELISA試劑盒試驗(yàn)中,酶標(biāo)板是所需設(shè)備之一,有著重要作用。今天我司為您解析ELISA酶標(biāo)板的三大分類,中結(jié)合力:此種酶標(biāo)板,外表經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合才能大大增強(qiáng),可達(dá)300~400ngIgG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標(biāo)板可提高敏感性,并可相對(duì)削減包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反響??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無(wú)法有效地關(guān)閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為關(guān)閉劑。高結(jié)合力:此類酶標(biāo)板經(jīng)...
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試劑盒實(shí)驗(yàn)為什么不是大家想要的結(jié)果?
2019-5-27
1725
我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)過(guò)程中能夠盡量避免哪些常犯的錯(cuò)誤呢?就是這樣在不斷探索中尋求真理。絕大多數(shù)ELISA實(shí)驗(yàn)人員zui頭疼的問(wèn)題,莫過(guò)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想。其實(shí)做科研實(shí)驗(yàn),很難有人能夠的實(shí)驗(yàn)成功。但是,今天讓我們一起來(lái)看一下,影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想的原因有哪些?1.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說(shuō)明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。2.要保證加液量一致我...