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細(xì)胞培養(yǎng)過程中的若干問題
2009-9-27
2326
1冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。2懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。3可否使用與原先培養(yǎng)...
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酶標(biāo)儀選購(gòu)
2009-9-23
2385
隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,酶標(biāo)儀在臨床檢驗(yàn)中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。那么,什么樣的酶標(biāo)儀zui受臨床檢驗(yàn)人員歡迎,又應(yīng)當(dāng)怎樣選擇酶標(biāo)儀呢?首先,酶標(biāo)儀體積不宜太大。檢驗(yàn)室空間有限,儀器體積太大會(huì)占據(jù)很多空間,給其他工作帶來不便。這也是小巧玲瓏、外形美觀的機(jī)型受人青睞的原因。此外,在檢驗(yàn)過程中,經(jīng)常會(huì)有樣品液體外濺,所以酶標(biāo)儀外殼要易于消毒、清潔。第二,可容納更多的信息。隨著醫(yī)保制度改期的進(jìn)行和《醫(yī)療事故處理?xiàng)l例》的頒布實(shí)施,在處理日趨增多的醫(yī)療糾紛過程中,醫(yī)院事故技術(shù)鑒定材料的重要...
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血清總蛋白質(zhì)的測(cè)定方法
2009-9-18
3936
血清總蛋白質(zhì)的測(cè)定方法1、凱氏定氮法仍然是建立各個(gè)具體方法時(shí)采用的參考標(biāo)準(zhǔn)方法。2、雙縮脲比色法是目前首先推薦的蛋白質(zhì)定量方法。方法操作簡(jiǎn)便,雖然雙縮脲試劑有大同不異。其中酒石酸鉀納可以穩(wěn)定在堿性溶液中的銅離子,含有碘化物作為抗氧化劑。雙縮脲反應(yīng)生成的復(fù)合物其吸收峰為540nm??刹捎?的標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品,經(jīng)稱量,必要時(shí)用凱氏定氮法標(biāo)定。各地質(zhì)控中心提供的混合標(biāo)準(zhǔn)血清可作為第二參考,血清用量100μl,在10-120g/L濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,批內(nèi)CV值3、染料...
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液氮罐使用注意事項(xiàng)
2009-9-16
2885
液氮罐的使用與保管需注意以下幾個(gè)方面:一、使用前的檢查液氮罐在充填液氮之前,首先要檢查外殼有無凹陷,真空排氣口是否完好。若被碰壞,真空度則會(huì)降低,嚴(yán)重時(shí)進(jìn)氣不能保溫,這樣罐上部會(huì)結(jié)霜,液氮損耗大,失去繼續(xù)使用的價(jià)值。其次,檢查罐的內(nèi)部,若有異物,必須取出,以防內(nèi)膽被腐蝕。二、使用過程中的檢查使用過程中要經(jīng)常檢查??梢杂醚塾^測(cè)也可以用手觸摸外殼,若發(fā)現(xiàn)外表掛霜,應(yīng)停止使用;特別是頸管內(nèi)壁附霜結(jié)冰時(shí)不宜用小刀去刮,以防頸管內(nèi)壁受到破壞,造成真空不良,而是應(yīng)將液氮取出,讓其自然融化...
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ELISA的概念、原理、操作步驟
2009-9-11
2585
ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。(一)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,...
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甲基化芯片在遺傳學(xué)中的應(yīng)用
2009-9-9
2406
表觀遺傳改變可以定義為基因的遺傳性或獲得性改變,但是這種改變和DNA序列改變無關(guān)。DNA甲基化是zui為常見的表觀遺傳改變;啟動(dòng)子或*外顯子CpG島中的甲基化改變將導(dǎo)致基因表達(dá)失活;組蛋白的化學(xué)修飾也可以作為表觀遺傳改變;組蛋白發(fā)生乙?;淖兊幕蛲ǔ1婚_啟。CpG島的異常甲基化是導(dǎo)致基因沉默和過度表達(dá)的zui主要的改變,常規(guī)的方法不能在全基因組水平上對(duì)甲基化進(jìn)行檢查。表觀遺傳分析與基因芯片技術(shù)結(jié)合起來則可以高通量進(jìn)行甲基化的定性、定量分析。目前建立了2種基于芯片的甲基化分析...